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  • 使用固相萃取仪时的注意事项

    发布于 2023/02/15阅读(670)来源 ltrlw

    摘要

    使用固相萃取仪时的注意事项

    内容

            我们在用固相萃取仪时,面临的一个问题就是:液体应该以什么速率过柱流出,我的经验是,要想效果好,就要慢,尽量慢。.
            对于固相萃取仪柱中的填料,我们如果局部放大地看,能够看到其实它们是有很多的空際,液体流通的渠道很多,如果流得快,相当比例的待测组分还来不及与填料充分作用就地从通道流失;所以要慢,给它们一个充分作用的机会。
            如何慢呢?一个窍门就是不要用配合抽气机使用的所谓固相萃取仪器,而采用再普通不过的重力法。利用重力的作用使液体向下流出。在实验速度上,重力法远不如吸力法,但是在实验效果方面,重力法远比吸力法优胜,用吸力法只能得到谱带吸附,用重力法却能得到柱头吸附,在速度和效果两者的平衡中,我们还是倾向于优先保证好的效果。
            举例来说,一个3ml500mg的C18小柱,如果加甲醇活化,其甲醇全部流至筛板时间约为20分钟,而在过样品液时,25ml 的液体*多2小时可以流完,而且用重力法如果得当,工作速率不比吸力法差很多。因为我们可以充分利用空闲时间,用吸力法*须有人在旁边守候,而重力法由于不需要用电,可以充分利用午休和晚上时间过柱,液体量大时接个堆叠接头和延长管即可,安排好实验步骤,工作效率一样很高。另外,重力法不需要抽气机和固相萃取仪器。
            在固相萃取仪条件选择上,有人为了提高提取效率,尽量多加液体,或选择填料量大的小柱,我觉得大可不*如此。尤其在用重力法时,由于效率高,很多情况下是柱头吸附,并不是所有的填料都在起作用,填料多了不仅液体流出速度会更慢,而且在洗脱时的扩散会很明显。
            因此建议,够用就行,在能保证效率时,填料尽量少,加液也不宜多。
            固相萃取仪从原理上是色谱分离,但是在操作时*好只把它作为吸附萃取剂使用,由于填料性质、松紧常有差异,因此在实际实验中不*因为追求效果的*佳化而设计出很复杂的洗脱程序。
            在建立条件中,我们应该尽量多利用现成的资料,尽快地建立起体系,同时要对操作过于复杂的步骤保持警惕性,在实验效果,实验速率和易操作性三者中取得平衡点。
            固相萃取柱*好只用一.次。因为从严格的意义上来说,很多物质的吸附是不可逆的,一次吸附, 无法洗脱,影响着下一次吸附,虽然有人做过重复利用的实验,但是总体来说为了节省- -点经费而大大增加了结果的不可靠性和不确定性,是很不合算的行为。

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