影响色谱柱使用寿命的因素及解决方法
在以水溶液为活动相时,水溶液中的微生物例如细菌轻易生长,当用水溶液或有机酸缓冲液保护柱子时,一些霉菌可能在色谱柱中滋生,堵塞固定相颗粒间的空隙。由于湿法填充技术的问世,目前普遍使用的色谱柱填料直径一般都小于10um,活动相中的颗粒杂质很轻易先沉积在柱头然后慢慢堵塞柱子。活动相的pH值对色谱柱也有影响,特别是对化学键合硅胶填料,水溶液的pH最适范围在2~7.5之间,当pH>8时,硅胶会释出天生絮状物堵塞柱子,且难以复原,柱效很快降低,甚至完全失效。当在缓冲液中加进有机溶剂例如甲醇或乙腈时,盐类的溶解度下降,会析出盐沉淀,堵塞柱子。同时活动相中的有机溶剂和盐会腐蚀色谱柱头的筛板,产生柱头凹陷。活动相的极性对柱子也有一定影响,对于硅胶柱,甲醇、水、冰乙酸等极性较大物质会破坏填料,反之,对于化学键合硅胶,极性小的物质如正丁醇、二氯甲烷等也起同样的作用。碱性溶液会破坏阳离子交换树脂色谱柱,而酸性溶液轻易损坏阴离子交换树脂柱。